XSELECT HSS XP色譜柱的使用
為了確保XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱始終保持理想性能,請(qǐng)遵循以下原則:
a. 樣品制備
1. 樣品中的雜質(zhì)和/或顆粒通常會(huì)造成色譜柱污染。避免色譜柱污染的方式之一是使用Waters Oasis™或Sep-Pak™固相萃取(SPE)產(chǎn)品。
2. 優(yōu)先選用初始流動(dòng)相條件或更弱的溶劑制備樣品,以獲得理想的峰形和靈敏度。
3. 如果未使用流動(dòng)相制備樣品,請(qǐng)確保樣品、溶劑和流動(dòng)相可以混溶,以避免樣品和/或緩沖液產(chǎn)生沉淀。
4. 用0.2μm濾膜過(guò)濾樣品,去除顆粒物質(zhì)。如果用于溶解樣品的溶劑中含有機(jī)溶劑(如乙腈、甲醇等),請(qǐng)確保濾膜/過(guò)濾器材料與該溶劑不相容?;蛘撸梢钥紤]在8000 rpm下離心樣品溶液20 min,然后將上清液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)臉悠菲恐小?/span>
b. pH范圍
溫度、流動(dòng)相pH值以及所用緩沖液/添加劑類(lèi)型將共同影響色譜柱的使用壽命。表5列出了XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱的建議緩沖液和添加劑。
注:在pH、溫度和壓力限值組合條件下運(yùn)行會(huì)導(dǎo)致色譜柱使用壽命縮短。
c. 溶劑
為了保持理想的色譜柱性能,請(qǐng)使用高品質(zhì)HPLC級(jí)溶劑或MS級(jí)溶劑。所有水相緩沖液在使用前都應(yīng)使用0.2μm濾膜過(guò)濾。含有懸浮顆粒物的溶劑常常會(huì)堵塞色譜柱入口的篩板,
這會(huì)導(dǎo)致柱壓增大或者峰形變形。
d. 壓力
XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱兼容HPLC、UHPLC和UPLC背壓。表6所示為操作壓力上限。
e. 溫度
XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱只可耐受中等溫度條件,以改善選擇性、降低溶劑粘度和提高傳質(zhì)速率。
注:在極端pH、溫度和壓力組合條件下運(yùn)行會(huì)導(dǎo)致色譜柱使用壽命縮短。